加味宫外孕Ⅱ号方对HTR-8/SVneo细胞内质网应激JNK信号通路的凋亡作用

摘要
图/表
参考文献(25)
相关文章 (15)

全文: PDF (708 KB) HTML (1 KB)
输出: BibTeX | EndNote (RIS)

摘要目的基于内质网应激JNK信号通路研究加味宫外孕Ⅱ号方对滋养细胞凋亡的影响。方法取36只雌性SD大鼠，体重180～220 g，采用随机数字表法分为六组，每组6只，即阴性对照组（中药中剂量等体积的生理盐水），中药低、中、高剂量组[12、24、48 g/（kg·d）]，西药组（中药中剂量等体积的生理盐水+肌注甲氨喋呤7.775 mg/kg），中西药结合组（中药中剂量24 g/kg+肌注甲氨喋呤7.775 mg/kg），中药处理8 d后和西药给药1次后采血并分离血清。将不同组别的含药血清分别与HTR-8/SVneo细胞共同培养24 h后，运用Western blot检测IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2、p-JNK蛋白和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2 mRNA表达情况。另设未用血清处理的细胞作为空白对照组，以排除血清成分复杂所带来的干扰。结果与空白对照组比较，阴性对照组IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2、p-JNK蛋白表达量和IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2 mRNA表达量无明显变化（P ＞ 0.05）。与阴性对照组比较，中药各剂量组、西药组和中西药结合组JNK1、JNK2蛋白表达量无明显变化（P ＞ 0.05），而IRE1α、TRAF2、ASK1、p-JNK蛋白和IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2 mRNA表达量均增加，差异均有统计学意义（均P ＜ 0.05）；中药高剂量组IRE1α、TRAF2、p-JNK蛋白和IRE1α、TRAF2、JNK1、JNK2 mRNA表达量均高于中药中、低剂量组，差异均有统计学意义（均P ＜ 0.05）；中药中剂量组IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白和IRE1α、ASK1、JNK1 mRNA表达量均高于中药低剂量组，差异均有统计学意义（均P ＜ 0.05）；与中药高剂量组比较，西药组和中西药结合组IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白和IRE1α、JNK1 mRNA表达量均增加，差异均有统计学意义（均P ＜ 0.05）；与西药组比较，中西药结合组IRE1α蛋白和IRE1α、ASK1、JNK1、JNK2 mRNA表达量无明显变化，差异无统计学意义（P ＞ 0.05），ASK1蛋白表达量增加，而TRAF2、p-JNK蛋白表达量和TRAF2 mRNA表达量均减少，差异均有统计学意义（均P ＜ 0.05）。结论加味宫外孕Ⅱ号方能引发内质网过度应激并激活JNK信号通路，进而促使细胞凋亡，且可能存在剂量相关性。

	服务

	把本文推荐给朋友
	加入我的书架
	加入引用管理器
	E-mail Alert
	RSS
	作者相关文章
	简咏男1 郑文兰2

关键词 ：内质网应激, JNK信号通路, HTR-8/SVneo细胞, 加味宫外孕Ⅱ号方, 细胞凋亡

Abstract：Objective To research modified decoction Ⅱ of ectopic pregnancy to nourish the effect of cell apoptosis based on the endoplasmic reticulum stress JNK signaling pathway. Methods Thirty-six female SD rats weighing 180-220 g were divided into six groups by random number table method, each with six rats, namely the negative control group (equal volume of normal saline in the dose of medium traditional Chinese medicine), low, medium and high dose traditional Chinese medicine group (12, 24 and 48 g/[kg·d]), Western medicine group (equal volume of normal saline in the dose of medium traditional Chinese medicine + 7.775 mg/kg Methotrexate), Chinese and Western medicine combination group (24 g/kg+7.775 mg/kg Methotrexate). Blood samples were collected and serum was separated eight days after treatment with traditional Chinese medicine and once after administration of Western medicine. After different groups of drug-containing serum were cultured with HTR-8/SVneo cells for 24 hours respectively, Western blot was used to detect the protein expressions of IRE1α, TRAF2, ASK1, JNK1, JNK2, p-JNK and quantitative real-time PCR (qRT-PCR) was used to detect the mRNA expressions of IRE1α, TRAF2, ASK1, JNK1, JNK2. In addition, cells not treated with serum were used as blank control group to exclude interference caused by complex serum composition. Results Compared with the blank control group, the expression levels of IRE1α, TRAF2, ASK1, JNK1, JNK2 and p-JNK proteins and the expression levels of IRE1α, TRAF2, ASK1, JNK1 and JNK2 mRNA in the negative control group showed no significant changes (P ＞ 0.05). Compared with the negative control group, the expression levels of JNK1 and JNK2 proteins in the traditional Chinese medicine dose groups, the Western medicine group and the Chinese and Western medicine combination group showed no significant changes (P ＞ 0.05), while the expression levels of IRE1α, TRAF2, ASK1, p-JNK proteins, and the expression levels of IRE1α, TRAF2, ASK1, JNK1 and JNK2 mRNA were all increased, with statistically significant differences (all P ＜ 0.05). The expression levels of IRE1α, TRAF2, p-JNK proteins and the expression levels of IRE1α, TRAF2, JNK1 and JNK2 in the high dose traditional Chinese medicine group were higher than those in the low and medium dose traditional Chinese medicine groups, and the differences were statistically significant (all P ＜ 0.05). The expression levels of IRE1α, ASK1, p-JNK proteins and the expression levels IRE1α, ASK1 and JNK1 mRNA in the medium dose traditional Chinese medicine group were higher than those in the low dose traditional Chinese medicine group, and the differences were statistically significant (all P ＜ 0.05). Compared with the high dose traditional Chinese medicine group, the expression levels of IRE1α, ASK1, p-JNK proteins and IRE1α, JNK1 mRNA in the Western medicine group and the Chinese and Western medicine combination group were increased, and the differences were statistically significant (all P ＜ 0.05). Compared with the Western medicine group, the expression levels of IRE1α protein and IRE1α, ASK1, JNK1 and JNK2 mRNA in the Chinese and Western medicine combination group showed no significant changes, and the differences were not statistically significant (P ＞ 0.05). ASK1 protein expression was increased, while TRAF2, p-JNK protein expression and TRAF2 mRNA expression were decreased, with statistically significant differences (all P ＜ 0.05). Conclusion The modified decoction Ⅱ of ectopic pregnancy can cause excessive endoplasmic reticulum stress and activate the JNK signaling pathway, leading to cell apoptosis, and possible relevance dose.

Key words： Endoplasmic reticulum stress JNK signal pathway HTR-8/SVneo cells Modified decoction Ⅱ of ectopic pregnancy Apoptosis

基金资助:国家自然科学基金资助项目（81660805）。

通讯作者: 郑文兰（1963-），女，主任医师，硕士生导师；研究方向：异位妊娠。

作者简介: 简咏男（1992-），女，贵州中医药大学研究生院2018级妇科专业在读硕士研究生；研究方向：异位妊娠。

引用本文:

简咏男1 郑文兰2. 加味宫外孕Ⅱ号方对HTR-8/SVneo细胞内质网应激JNK信号通路的凋亡作用[J]. 中国医药导报, 2021, 18(3): 4-8,16.
JIAN Yongnan1 ZHENG Wenlan2. Effect of modified decoction Ⅱ of ectopic pregnancy on apoptosis of endoplasmic reticulum stress JNK signaling pathway in HTR-8/SVneo cells. 中国医药导报, 2021, 18(3): 4-8,16.

链接本文:

http://www.yiyaodaobao.com.cn/CN/ 或 http://www.yiyaodaobao.com.cn/CN/Y2021/V18/I3/4

[1] 闫翠云，宋伟，魏涛.输卵管妊娠不同治疗方案对再次妊娠状况的影响[J].中国药物与临床，2018，18（11）：1959-1960.
[2] Hu LY，Zhang WY，Li LA，et al. Clinical investigation of risk factors in ectopic pregnancy [J]. Med J Chin People’s Lib Army，2013，38（5）：412-415.
[3] 郑文兰，赵春梅，杨江燕.活血杀胚消癥法对早孕大鼠妊娠滋养细胞影响的实验研究[J].云南中医中药杂志，2013，34（10）：60-61，89.
[4] 李艳，曹美群，陶文聪，等.黄芪散对高脂饮食诱导肥胖大鼠肝脏内质网应激信号通路的影响[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（21）：6-11.
[5] 于红红，俞琦，蔡琨，等.泻心汤含药血清对RAW264.7源性泡沫细胞TLR9/MyD88/NF-κB p65信号通路的影响[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（18）：24-29.
[6] 范敏，郑文兰，文晓敏.加味宫外孕Ⅱ号方对人滋养叶细胞Caspase-12通路影响的研究[J].中国比较医学杂志，2020，30（8）：29-34.
[7] Pfeffer CM，Singh ATK. Apoptosis：A target for anticancer therapy [J]. Int J Mol Sci，2018，19（2）：E448.
[8] Barichievy S，Naidoo J，Boullé M，et al. Viral apoptosis evasion via the MAPK pathway by use of a host long noncoding RNA [J]. Front Cell Infect Microbiol，2018，8（3）：263．
[9] 马燕花，师霞，韩涛，等.慈菇消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠JNK1、p-c-Jun和Caspase-8表达的影响[J].中国中医药信息杂志，2019，26（9）：55-59.
[10] 李盛楠，刘洋，刘小菲，等.基于JNK通路探讨调更汤对GT1-7下丘脑神经元细胞凋亡的保护作用[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（20）：49-55.
[11] 陈阳，果佳霖，马丽杰.JNK信号传导通路在胆汁淤积性肝损伤机制中的作用[J].生理科学进展，2018，49（1）：49-52.
[12] 金蓉蓉.补阳还五汤对帕金森病大鼠药理作用及JNK通路调控作用研究[J].新中医，2019，51（5）：72-75.
[13] 陆建红，黄晓文，金益军，等.丹参酮ⅡA通过JNK通路诱导人骨肉瘤HOS细胞凋亡[J].中国病理生理杂志，2019，35（1）：28-33.
[14] 孙为增，林国雄，林海.沉默钙连蛋白对人肾母细胞瘤细胞凋亡及内质网应激、JNK信号通路的影响[J].山东医药，2017，57（40）：22-25.
[15] 李金贵，刘川，万华，等.白藜芦醇诱导前列腺癌细胞凋亡的实验研究[J].遵义医学院学报，2018，41（3）：272-276．
[16] Gong J，Wang XZ，Wang T. Molecular signal networks and regulating mechanisms ofthe unfolded protein response [J]. J Zhejiang Univ Sci B，2017，18（1）：1-14．
[17] 帅瑜，张思泉，沈鑫，等.当归补血汤对糖尿病大鼠肾组织内质网IRE1α-JNK通路的抑制作用[J].中华中医药学刊，2018，36（6）：1372-1375.
[18] Wu L，Cai B，Zheng S，et al. Effect of emodin on endoplasmic reticulum stress in rats with severe acute pancreatitis [J]. Inflammation，2013，36（5）：1020-1029.
[19] 金美英，崔镇海，朴春丽，等.基于IRE1α/JNK通路探析解毒通络调肝方对2型糖尿病调控机制[J].中华中医药杂志，2018，33（12）：5353-5357.
[20] 谢伟昌，刘磊，姜小艳，等.基于内质网IRE1-JNK通路探讨萎胃颗粒治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制[J].现代中西医结合杂志，2020，29（21）：2298-2301.
[21] Chen Y，Brandizzi F. IRE1：ER stress sensor and cell fate executor [J]. Trends in Cell Biol，2013，23（11）：547-555.
[22] 孙建华，郜洁，刘开飞，等.化瘀消癥颗粒对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo侵袭迁移的影响[J].中成药，2019，41（11）：2761-2765.
[23] 钟方明，吕望，邓方礼逵，等.重楼皂苷Ⅵ激活JNK通路诱导食管癌细胞凋亡和抑制ERK/c-Myc通路调节有氧糖酵解的研究[J].中国肿瘤，2020，29（1）：63-69.
[24] 李晓荣，郜洁，邓高丕.化瘀消癥杀胚中药对输卵管妊娠滋养细胞凋亡及凋亡通路的影响[J].中华中医药杂志，2018，33（10）：4351-4356.
[25] 郑文兰，杨江燕，谢智，等.加味宫外孕Ⅱ号方对早孕大鼠滋养细胞凋亡因子Bax、Bcl-2的影响[J].云南中医中药杂志，2015，36（12）：73-74.