DIO1抑制喉鳞状细胞癌侵袭转移的机制研究

doi:10.20047/j.issn1673-7210.2023.18.05

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摘要目的研究碘甲原氨酸脱碘酶Ⅰ（DIO1）在喉鳞状细胞癌（LSCC）侵袭转移中的调控作用。方法将TU686细胞分为对照组（正常TU686细胞）和DIO1过表达组（转染DIO1），并根据过表达量继续分为DIO1-1 μg组、DIO1-2 μg组。RT-qPCR检测DIO1基因表达，CCK-8实验检测细胞增殖能力，PI/DAPI染色检测细胞凋亡情况，划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力，基因探针富集分析相关基因集的富集情况，Western blot检测DIO1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、p-S6K1、p-4EBP1、p-Akt蛋白表达水平。结果 DIO1过表达组DIO1 mRNA、蛋白水平高于对照组（P＜0.01）。24、48、72 h，DIO1过表达组光密度值低于对照组（P＜0.01）。DIO1过表达组PI染色阳性比例高于对照组（P＜0.01）。DIO1过表达组相对迁移距离短于对照组（P＜0.01）。DIO1过表达组迁移及侵袭能力低于对照组（P＜0.01）。DIO1表达与上皮间质转化、mTORC1信号通路相关基因集的表达呈负相关（NES＜0）。DIO1-1 μg组、DIO1-2 μg组E-cadherin高于对照组，N-cadherin、Vimentin、p-S6K1和p-4EBP1低于对照组（P＜0.01）。DIO1-1 μg组、DIO1-2 μg组与对照组p-Akt比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 DIO1可作为抑癌基因，在LSCC侵袭转移中起关键作用。

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	任楠1　　刘金婧1　　徐海铭1　　赵凯2　　刘明波1

关键词 ：喉鳞状细胞癌, 碘甲原氨酸脱碘酶Ⅰ, 侵袭与转移

Abstract：Objective To study the regulatory effect of deiodinase iodothyronine type Ⅰ (DIO1) on invasion and metastasis in laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). Methods The TU686 cells were divided into control group (normal TU686 cells) and DIO1 overexpression group (transfection of DIO1), and DIO1-1 μg group and DIO1-2 μg group were further divided according to overexpression level. DIO1 gene expression was detected by RT-qPCR, cell proliferation was detected by CCK-8 assay, cell apoptosis was detected by PI/DAPI staining, cell migration and invasion ability were detected by scratch assay and Transwell assay, the enrichment of related gene sets was analyzed by gene probe enrichment analysis, and the protein expression levels of DIO1, E-cadherin, N-cadherin, Vimentin, p-S6K1, p-4EBP1, and p-Akt were detected by Western blot. Results DIO1 mRNA and protein level of DIO1 overexpression group were higher than those of control group (P＜0.01). At 24, 48, 72 h, optical density values of DIO1 overexpression group were lower than those of control group (P＜0.01). The positive percentage of PI staining in DIO1 overexpression group was higher than that in control group (P＜0.01). The relative migration distance of DIO1 overexpression group was shorter than control group (P＜0.01).Migration and invasion ability of DIO1 overexpression group was lower than control group (P＜0.01). DIO1 expression was negatively correlated with the expression of epithelial-mesenchymal transition and mTORC1 signaling pathway genes(NES＜0). E-cadherinin DIO1-1 μg group and DIO1-2 μg group were higher than those in control group, while N-cadherin and Vimentin, p-S6K1， and p-4EBP1 were lower than those in control group (P＜0.01). There were no significant differences in p-Akt between control group and DIO1-1 μg group, DIO1-2 μg group (P＞0.05). Conclusion DIO1 can be a tumor suppressor gene and play a key role in the invasion and metastasis of LSCC.

Key words： Laryngeal squamous cell carcinoma Deiodinase iodothyronine type Ⅰ Invasion and metastasis

基金资助:中央引导地方科技发展专项资金项目（ZY2021HN03）；
海南省科技计划项目（LCYX202105）。

通讯作者: 刘明波（1968.3-），男，博士，主任医师，解放军总医院海南医院耳鼻咽喉头颈外科主任；研究方向：头颈肿瘤的临床与基础研究。

作者简介: 任楠（1996.5-），女，硕士；研究方向：头颈肿瘤的临床与基础研究。

引用本文:

任楠1　　刘金婧1　　徐海铭1　　赵凯2　　刘明波1. DIO1抑制喉鳞状细胞癌侵袭转移的机制研究[J]. 中国医药导报, 2023, 20(18): 25-29.
REN Nan1 LIU Jinjing1 XU Haiming1 ZHAO Kai2 LIU Mingbo1. Study on the mechanism of DIO1 inhibiting invasion and metastasis in laryngeal squamous cell carcinoma. 中国医药导报, 2023, 20(18): 25-29.

链接本文:

https://www.yiyaodaobao.com.cn/CN/10.20047/j.issn1673-7210.2023.18.05 或 https://www.yiyaodaobao.com.cn/CN/Y2023/V20/I18/25

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